1. 細胞房著裝要求
操作細胞培養(yǎng)物前后應酒精噴灑消毒手部，穿戴個人防護裝備不僅可保護您免受危險品污染，還可降低皮屑以及衣服上污物和灰塵污染培養(yǎng)物的可能。
正確的穿衣順序：
（1）一更：換鞋，手消，戴口罩，戴帽子；
（2）二更：穿無菌衣、無菌手套、手消、酒精噴灑消毒鞋底；
2. 超凈臺試劑布局
超凈工作臺或生物安全柜里的物品擺放一般遵循以下右手使用習慣，并可根據(jù)特殊實驗中增加物品進行相應的改動。
- 在工作臺中部開闊區(qū)域放置細胞培養(yǎng)容器；② 移液器置于右前方易于取用的地方；③ 試劑和培養(yǎng)基置于右后方，便于吸??；④ 離心管架置于中后部，用于固定其他試劑；⑤ 小型容器置于左后部，用于盛放廢液。
3. 人為操作技巧
小心取用無菌實驗物品，勿碰觸吸管尖頭部或容器瓶口，也不要在打開的容器正上方操作實驗。
每次操作只處理一株細胞株，且即使培養(yǎng)基相同也不共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品全部帶出工作臺，以75%酒精擦拭無菌操作臺面并進行至少15min紫外燈照射消毒。操作間隔應讓無菌操作臺運轉(zhuǎn)10分鐘以上后，再進行下一個細胞株之操作。
離心管、凍存管等容器需用抗酒精的標記筆標示內(nèi)容物名稱、操作日期、操作人員姓名。若是細胞傳代培養(yǎng)，需注明目前的細胞代數(shù)，細胞名稱、細胞數(shù)量等信息。
4. 細胞房布局
(1) 細胞房功能分區(qū)
理想的無菌操作室應劃分為三部分：
a) 一更間---放在外，主要提供更換衣帽，鞋子，口罩，手套等。
b）二更間---位于更衣間與操作間之間，也可同時和幾個操作間相通。目的是保證操作間的無菌環(huán)境。
c）細胞操作間---放在內(nèi)間，分為無菌操作室、培養(yǎng)室。
房間設(shè)置要求：各個房間高度適宜（不超過2.5m），頂部過高會影響紫外線的滅菌效果；大小適當，房間過大，清掃和消毒不便；過小，操作不便；墻壁應光滑無死角，以便清洗和消毒。
(2) 細胞房設(shè)計原則及條件
設(shè)計原則：防止微生物污染和有害因素影響。
條件要求：封閉、正壓：隔離門和空調(diào)系統(tǒng)、潔凈通風系統(tǒng)；人流、物流獨立不交叉。
溫濕度：培養(yǎng)箱內(nèi)是37℃，飽和濕度；室內(nèi)是溫度18℃-26℃，濕度是45%-65%。
潔凈度：空氣潔凈度等級是潔凈空間單位體積空氣中，以大于或等于被考慮粒徑的離子最大濃度限值進行劃分的等級標準。潔凈度等級應在空態(tài)、靜態(tài)和動態(tài)放大進行測試，使用塵埃粒子測試儀來測定。保證在C級背景下的A級環(huán)境下操作。
(3) 細胞房維護保養(yǎng)：
（a） 每天檢查并記錄細胞房溫度、壓差、噪音、相對濕度（細胞房溫濕度記錄表)，發(fā)現(xiàn)異常要及時報告并處理。
（b） 生物安全柜或超凈臺維護：每年委托有資質(zhì)第三方對生物安全柜或超凈臺進行風速、氣流流型、高效測漏、塵埃粒子、沉降菌的檢測。
日常維護：定期對生物安全柜或超凈臺進行塵埃粒子、沉降菌或浮游菌的測試，發(fā)現(xiàn)不合格及時更換濾網(wǎng)或進行維修。
（c）空調(diào)系統(tǒng)維護: 定時更換初中效過濾器，每年請有資質(zhì)第三方對潔凈室進行塵埃粒子、沉降菌或浮游菌、換氣次數(shù)、高效測漏、壓差等檢測。
日常維護：按照要求定期監(jiān)測塵埃粒子、沉降菌或浮游菌。
